Plasmide Double Nickase (h) ABCA3: sc-402388-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ABCA3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ABCA3 Double Nickase (h) et le plasmide ABCA3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ABCA3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ABCA3 | sc-402388-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ABCA3 | sc-402388-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ABCA3 code un transporteur de la famille des transporteurs ABC (ATP‑binding cassette) localisé dans les corps lamellaires des cellules épithéliales alvéolaires de type II, où il utilise l’hydrolyse de l’ATP pour assurer la translocation de phospholipides nécessaire à la maturation et au stockage du surfactant pulmonaire. En régulant la biogenèse des corps lamellaires, le trafic vésiculaire et l’homéostasie lipidique, ABCA3 contribue à la stabilité alvéolaire et à l’efficacité des échanges gazeux. L’altération de la fonction d’ABCA3 est associée à un métabolisme du surfactant déficient et fait l’objet de nombreuses études dans le contexte de phénotypes de pneumopathies interstitielles héréditaires ou acquises. En tant que transporteur membranaire à expression restreinte à certains types cellulaires, ABCA3 sert également de modèle pour étudier la protéostasie, le contrôle qualité du réticulum endoplasmique (RE) et les voies de transport des lipides en biologie épithéliale.
ABCA3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ABCA3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ABCA3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ABCA3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ABCA3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.