Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide Double Nickase (m) A20/TNFAIP3: sc-423436-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) A20/TNFAIP3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide A20/TNFAIP3 Double Nickase (m) et le plasmide A20/TNFAIP3 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Tnfaip3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: A20/TNFAIP3 Antibody (A-12): sc-166692
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) A20/TNFAIP3 | sc-423436-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) A20/TNFAIP3 | sc-423436-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin *Tnfaip3* code A20/TNFAIP3, une enzyme d’édition de l’ubiquitine qui agit comme régulateur négatif central de la signalisation inflammatoire. A20 limite l’activation des voies NF-κB et MAPK en aval de récepteurs tels que TNFR, IL-1R et les récepteurs de type Toll, en modulant les chaînes d’ubiquitine liées K63 et M1 sur des adaptateurs clés de signalisation. En contrôlant des programmes transcriptionnels induits par les cytokines, A20 influence l’homéostasie de l’immunité innée et adaptative, la survie cellulaire et les réponses au stress. Une activité d’A20 dérégulée est impliquée dans des modèles d’auto-immunité, d’inflammation chronique et de signalisation oncogénique, où une activation persistante de NF-κB contribue à des phénotypes pertinents pour la maladie.
A20/TNFAIP3 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Tnfaip3 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Tnfaip3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Tnfaip3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Tnfaip3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.