Plasmide Double Nickase (h) 53BP2: sc-403004-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) 53BP2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide 53BP2 Double Nickase (h) et le plasmide 53BP2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TP53BP2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: 53BP2 Antibody (H-4): sc-398311
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) 53BP2 | sc-403004-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) 53BP2 | sc-403004-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TP53BP2 code pour 53BP2 (également appelé ASPP2), un adaptateur riche en proline qui se lie au domaine de liaison à l’ADN de p53 et module des programmes transcriptionnels régissant l’apoptose, le contrôle du cycle cellulaire et les réponses au stress. Par ses interactions avec des membres de la famille p53 et des composants de complexes cytosquelettiques et jonctionnels, 53BP2 fait le lien entre la surveillance du génome et la polarité cellulaire ainsi que les voies de signalisation de survie. Il participe à des voies associées aux réponses aux dommages de l’ADN, à la signalisation apoptotique et à la régulation des sorties transcriptionnelles qui influencent l’aptitude cellulaire. Une dérégulation de l’expression ou de la fonction de TP53BP2 a été associée à une altération de l’activité de la voie p53 et est étudiée dans le contexte de la biologie tumorale, de l’instabilité génomique et de défauts de mort cellulaire programmée.
53BP2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TP53BP2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TP53BP2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TP53BP2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TP53BP2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.