2X Laemmli Sample Buffer

Le tampon d'échantillonnage 2X Laemmli est un réactif largement utilisé dans la recherche en biochimie et en biologie moléculaire, en particulier pour la préparation d'échantillons de protéines pour l'électrophorèse sur gel de dodécyl sulfate de sodium et de polyacrylamide (SDS-PAGE). Nommé d'après son concepteur, Ulrich Laemmli, ce tampon contient une combinaison de Tris-HCl, de SDS, de glycérol, de β-mercaptoéthanol (ou DTT) et de colorant bleu de bromophénol. La composition du tampon garantit que les protéines sont dénaturées, réduites et uniformément chargées, ce qui facilite leur séparation en fonction du poids moléculaire lors de l'électrophorèse. Dans les applications de recherche, le tampon d'échantillonnage 2X Laemmli joue un rôle crucial dans l'analyse des protéines. Le composant SDS se lie aux protéines et leur confère une charge négative proportionnelle à leur longueur, ce qui permet de séparer les protéines uniquement en fonction de leur taille lorsqu'elles sont soumises à un champ électrique. L'agent réducteur, le β-mercaptoéthanol ou DTT, rompt les liaisons disulfures, ce qui garantit que les protéines sont entièrement dénaturées et que les polypeptides individuels peuvent être résolus avec précision. Le glycérol augmente la densité de l'échantillon, garantissant qu'il s'enfonce dans les puits du gel, tandis que le bleu de bromophénol sert de colorant de suivi pour contrôler la progression de l'électrophorèse. Les chercheurs utilisent le tampon d'échantillonnage Laemmli 2X pour préparer les échantillons en vue de diverses applications en aval, telles que le Western blotting, la spectrométrie de masse et d'autres analyses protéomiques. La préparation cohérente et fiable des échantillons permet une caractérisation détaillée de l'expression des protéines, des modifications post-traductionnelles et des interactions protéine-protéine, ce qui le rend indispensable à l'étude des processus cellulaires et des voies biochimiques.