Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO 20S Proteasome β5 (h): sc-402449
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- 20S Proteasome β5 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique 20S Proteasome β5, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: 20S Proteasome β5 Antibody (A-10): sc-393931
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO 20S Proteasome β5 (h) | sc-402449 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
PSMB5 code la sous-unité catalytique β5 du cœur du protéasome 20S, qui assure l’activité de type chymotrypsine indispensable à la dégradation des protéines dépendante de l’ATP par le système ubiquitine–protéasome. Cette voie protéolytique régule le contrôle qualité des protéines, le traitement des antigènes pour leur présentation par le CMH de classe I, ainsi que le renouvellement de régulateurs clés du cycle cellulaire et des réponses au stress. Une altération de la fonction du protéasome a été associée à une protéostase dérégulée, à la signalisation du stress oxydatif et du réticulum endoplasmique (RE), et à des modifications des voies NF-κB et apoptotiques. PSMB5 est également étudié dans des contextes tels que la signalisation proliférative et les réponses à l’inhibition du protéasome, où l’activité de β5 peut influencer la sensibilité cellulaire et des phénotypes de résistance.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO 20S Proteasome β5 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène PSMB5 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du PSMB5, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert PSMB5 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine 20S Proteasome β5.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en PSMB5 pour l'étude de la signalisation de 20S Proteasome β5, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de PSMB5 essentiels à la fonction de 20S Proteasome β5
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de PSMB5 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le 20S Proteasome β5 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le 20S Proteasome β5 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus PSMB5. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le 20S Proteasome β5 plasmide HDR (h) et le 20S Proteasome β5 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie PSMB5 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles PSMB5 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.