δ-casein Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419849
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- δ-casein O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico δ-casein, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
δ-casein Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419849 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Csn1s2b codifica a δ-caseína, uma proteína do leite secretada e expressa na glândula mamária, que contribui para a estrutura das micelas de caseína e para a ligação de cálcio/fosfato durante a lactação. Como parte do cluster de genes de caseína, a sua transcrição é rigidamente regulada ao longo da gestação e da lactação pela sinalização prolactina/JAK2–STAT5 e por outras vias responsivas a hormonas que coordenam a síntese e a secreção de proteínas do leite. Padrões alterados de expressão de caseínas são usados como indicadores de diferenciação do epitélio mamário e de competência lactogénica, e os genes da família das caseínas são frequentemente monitorizados em estudos do desenvolvimento da glândula mamária e de respostas ao stress. Em modelos murinos, a perturbação de componentes das caseínas pode esclarecer mecanismos subjacentes à composição do leite, à nutrição neonatal e a fenótipos relacionados com a lactação.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO δ-casein (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Csn1s2b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Csn1s2b, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Csn1s2b na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína δ-casein.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Csn1s2b para a investigação da sinalização de δ-casein, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Csn1s2b críticos para a função δ-casein
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Csn1s2b para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo δ-casein Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo δ-casein Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Csn1s2b. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo δ-casein Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR δ-casein (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Csn1s2b para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Csn1s2b definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.