Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
β-glucuronidase Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404187-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- β-glucuronidaseO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase β-glucuronidase (h) e o Plasmídeo Double Nickase β-glucuronidase (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GUSB. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:β-glucuronidase Anticorpo (E-11): sc-374629
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
β-glucuronidase Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404187-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
β-glucuronidase Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404187-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GUSB codifica a β‑glucuronidase humana, uma hidrolase lisossomal que remove resíduos de ácido β‑D‑glucurónico de glicosaminoglicanos e de outros glucurónidos durante a renovação de macromoléculas. Esta enzima é central em vias catabólicas dependentes do lisossoma, sustentando a homeostase celular por meio de tráfego coordenado, acidificação e degradação de substratos. A disrupção da atividade de GUSB perturba o processamento de glicosaminoglicanos e a função lisossomal, tornando-o um gene-chave para estudar a biologia do armazenamento lisossomal e desregulações metabólicas relacionadas. Como uma enzima marcadora lisossomal amplamente utilizada, a β‑glucuronidase também fornece uma leitura funcional da biogénese lisossomal e da depuração de substratos em modelos celulares.
β-glucuronidase O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GUSB em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GUSB. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GUSB. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GUSB interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.