Plasmide Double Nickase (h) β3Gn-T3: sc-411457-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) β3Gn-T3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide β3Gn-T3 Double Nickase (h) et le plasmide β3Gn-T3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant B3GNT3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) β3Gn-T3 | sc-411457-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) β3Gn-T3 | sc-411457-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
B3GNT3 code la glycosyltransférase humaine β3Gn-T3, une enzyme localisée dans l’appareil de Golgi qui catalyse le transfert de N‑acétylglucosamine en liaison β1,3 vers des accepteurs glycanes afin d’allonger les structures de poly‑N‑acétyllactosamine sur les glycoprotéines et les glycolipides. En régulant l’élaboration des N‑glycanes et des O‑glycanes, β3Gn-T3 contribue à la maturation des glycoprotéines, à la liaison des lectines et aux interactions cellule–cellule ou cellule–matrice, qui influencent l’adhérence et la signalisation. Des modifications de l’expression ou de l’activité de B3GNT3 ont été associées à des changements des profils de glycosylation observés dans plusieurs contextes pathologiques, notamment le remodelage des glycanes associé aux tumeurs et des processus liés à l’immunité. Par conséquent, B3GNT3 est fréquemment étudié dans des travaux de glycobiologie portant sur les réseaux de glycosylation du Golgi, le trafic des récepteurs et les interactions avec la matrice extracellulaire.
β3Gn-T3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus B3GNT3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de B3GNT3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de B3GNT3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de B3GNT3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.