Plasmide Double Nickase (h) α2A-AR: sc-401545-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) α2A-AR correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide α2A-AR Double Nickase (h) et le plasmide α2A-AR Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ADRA2A. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) α2A-AR | sc-401545-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) α2A-AR | sc-401545-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ADRA2A code le récepteur adrénergique humain α2A (α2A-AR), un RCPG couplé à Gi/o qui module la libération de neurotransmetteurs et le tonus sympathique en inhibant l’adénylate cyclase, en diminuant l’AMPc intracellulaire et en régulant l’activité des canaux Ca2+ et K+. La signalisation de l’α2A-AR s’intègre aux voies MAPK/ERK et à des voies liées à la PLC afin de moduler, selon le type cellulaire, la transmission synaptique, la réactivité vasculaire et les réponses sécrétoires endocrines. La dérégulation de l’expression d’ADRA2A ou de la signalisation du récepteur a été étudiée dans le contexte de phénotypes neuropsychiatriques, de la physiologie autonome et cardiovasculaire, ainsi que de traits métaboliques, notamment la dynamique de la sécrétion d’insuline.
α2A-AR Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ADRA2A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ADRA2A. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ADRA2A. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ADRA2A.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.