α-sarcoglycan CRISPR/CAS9 KO Plasmid (m): sc-422904. Western blot analysis of α-sarcoglycan expression in empty vector control (A) and α-sarcoglycan CRISPR/CAS9 KO Plasmid transfected (B) NIH/3T3 whole cell lysates. Blot probed with α-sarcoglycan (F-7): sc-390647. β-actin (C4): sc-47778 used as specificity and loading control.
α-sarcoglycan CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-422904
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- α-sarcoglycan CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在α-sarcoglycan基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：α-sarcoglycan: sc-271321，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
α-sarcoglycan CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-422904 | 20 µg | $397.00 |
概述
Sgca 编码 α-肌聚糖（α-sarcoglycan），它是肌聚糖复合体的关键跨膜组分；该复合体位于肌营养不良蛋白–糖蛋白复合体（dystrophin–glycoprotein complex）中，可稳定肌膜（sarcolemma），并支持骨骼肌与心肌的力传递。通过将细胞外基质与细胞骨架连接起来，α-肌聚糖在收缩过程中维持膜完整性与机械信号转导，并保护肌纤维免受收缩诱导的损伤。Sgca 的破坏会扰乱肌营养不良蛋白相关蛋白复合体的组装，削弱肌纤维稳定性，从而为模型系统中类似肌营养不良的表型提供分子基础。因此，小鼠 Sgca 是研究肌膜黏附信号、肌肉变性/再生程序以及下游炎症与纤维化重塑通路的重要靶点。
α-sarcoglycan CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Sgca基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Sgca基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Sgca开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使α-sarcoglycan蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Sgca缺失的细胞模型，用于α-sarcoglycan信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 α-sarcoglycan 功能至关重要的 Sgca 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Sgca 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 α-sarcoglycan CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 α-sarcoglycan CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Sgca 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 α-sarcoglycan HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 α-sarcoglycan HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Sgca同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Sgca靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。