Plasmide Double Nickase (h) α N-catenin: sc-405168-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) α N-catenin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide α N-catenin Double Nickase (h) et le plasmide α N-catenin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CTNNA2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) α N-catenin | sc-405168-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) α N-catenin | sc-405168-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CTNNA2 code l’α N-caténine humaine, une protéine des jonctions d’adhérence se liant à l’actine, qui relie les complexes cadhérine–β-caténine au cytosquelette cortical afin de stabiliser l’adhésion cellule–cellule et de réguler l’architecture tissulaire. En coordonnant la mécanique des jonctions, l’α N-caténine influence le remodelage du cytosquelette, la connectivité neuronale et des sorties de signalisation qui recoupent la dynamique d’adhérence associée à Wnt/β-caténine. L’activité de CTNNA2 est étroitement liée à des processus tels que la migration cellulaire et l’organisation des synapses, où une altération de l’échafaudage d’adhérence peut perturber la formation des réseaux et le positionnement cellulaire. Des perturbations génétiques et d’expression de CTNNA2 ont été associées à des phénotypes neurodéveloppementaux et neuropsychiatriques, ce qui soutient son intérêt comme cible pour des études mécanistiques des fonctions cellulaires dépendantes de l’adhérence.
α N-catenin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CTNNA2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CTNNA2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CTNNA2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CTNNA2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.