α-actinin-4 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h2): sc-400548-KO-2

개요

ACTN4는 칼슘 비의존성 액틴 필라멘트 교차결합 단백질인 α-actinin-4를 암호화하며, 이는 초점부착(focal adhesion), 스트레스 섬유(stress fiber), 세포–세포 접합부에 국소화되어 세포골격 구조와 기계적 신호 전달을 조절합니다. α-actinin-4는 F-액틴 네트워크를 조직하고 이를 인테그린 연관 복합체와 연결함으로써 세포 부착, 퍼짐(spreading), 이동, 그리고 Rho GTPase 신호 및 기계신호전달(mechanotransduction)과 같은 경로에 영향을 주는 세포 강성 변화에 기여합니다. 또한 α-actinin-4는 세포질 내 역할뿐 아니라 단백질–단백질 상호작용을 통해 전사 프로그램을 조절하는 등 핵 내 기능에도 관여하는 것으로 보고되었습니다. ACTN4의 발현 이상 또는 돌연변이는 신장 족세포(podocyte) 기능 장애(국소분절성 사구체경화증 포함) 및 여러 종양 유형에서의 침윤성 표현형과 연관되어, 세포골격 조절과 질환 연관 세포 행동 연구에서의 중요성을 뒷받침합니다.

α-actinin-4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)는 human 세포주에서 ACTN4 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 ACTN4 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 ACTN4의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 α-actinin-4 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 α-actinin-4 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 ACTN4 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• α-actinin-4 기능에 중요한 ACTN4 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 ACTN4 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• α-actinin-4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 α-actinin-4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 ACTN4 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  α-actinin-4 HDR 플라스미드 (h) 및 α-actinin-4 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 ACTN4 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 ACTN4 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.