Plasmide Double Nickase (h) α3e Tubulin: sc-400023-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) α3e Tubulin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide α3e Tubulin Double Nickase (h) et le plasmide α3e Tubulin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TUBA3E. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) α3e Tubulin | sc-400023-NIC | 20 µg | $410.00 |
TUBA3E code l’α3e-tubuline, une sous-unité des microtubules se liant à la β-tubuline, qui soutient l’architecture du cytosquelette, le transport intracellulaire et l’organisation du fuseau mitotique. En tant que composant central du polymère de tubuline, l’α3e-tubuline contribue à la dynamique des microtubules qui sous-tend la progression du cycle cellulaire, la croissance des prolongements neuronaux et le trafic polarisé. Des perturbations de l’expression des isotypes de tubuline ou de la stabilité des microtubules peuvent modifier la ségrégation chromosomique et la motilité cellulaire, des processus fréquemment impliqués dans l’instabilité génomique et la biologie tumorale. TUBA3E est donc étudié dans des voies liées au remodelage du cytosquelette, à la mitose et aux réponses au stress induites par des composés ciblant les microtubules.
α3e Tubulin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TUBA3E dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TUBA3E. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TUBA3E. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TUBA3E.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.