Plasmide Double Nickase (h) α3C Tubulin: sc-400020-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) α3C Tubulin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide α3C Tubulin Double Nickase (h) et le plasmide α3C Tubulin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TUBA3C. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) α3C Tubulin | sc-400020-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) α3C Tubulin | sc-400020-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TUBA3C code l’α3C-tubuline humaine, un composant central des microtubules qui soutient l’architecture du cytosquelette, le transport intracellulaire et la formation dynamique du fuseau mitotique lors de la mitose. Par une polymérisation régulée avec d’autres isoformes d’α/β-tubuline, l’α3C-tubuline contribue à des processus dépendants des microtubules, notamment la polarité cellulaire, le trafic vésiculaire et la ségrégation des chromosomes, en s’intégrant à des voies qui contrôlent la progression du cycle cellulaire et le remodelage du cytosquelette. Des modifications de la dynamique des microtubules et de la composition en isotypes de tubuline sont fréquemment associées à l’instabilité génomique et à une prolifération dérégulée, ce qui rend la biologie des tubulines largement pertinente pour l’étude du comportement des cellules cancéreuses et des fonctions cellulaires du neurodéveloppement. En tant que composant du réseau des tubulines, TUBA3C est également utile pour analyser comment des perturbations du cytosquelette affectent le positionnement des organites, les réponses au stress et la fidélité de la mitose.
α3C Tubulin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TUBA3C dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TUBA3C. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TUBA3C. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TUBA3C.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.