Dans le contexte des activateurs 2500003M10Rik, la méthodologie HTS est centrée sur un système d'essai rapporteur sensible à l'activité transcriptionnelle du gène 2500003M10Rik. Généralement, un gène rapporteur, qui peut produire un signal fluorescent ou luminescent, est placé sous les séquences régulatrices du gène 2500003M10Rik. Lorsqu'un composé de la bibliothèque criblée réussit à activer ce promoteur, il déclenche l'expression du gène rapporteur, ce qui produit un signal détectable. L'intensité de ce signal est en corrélation avec l'activité du promoteur et, par extension, avec le potentiel du composé en tant qu'activateur. Une fois que les activateurs potentiels du gène 2500003M10Rik sont isolés par HTS, ils sont soumis à une série d'essais de validation pour confirmer leur activité. L'une des principales méthodes de validation est la réaction en chaîne de la polymérase quantitative (qPCR), qui fournit une quantification précise des niveaux d'ARNm du gène 2500003M10Rik après interaction avec les composés.
Une augmentation observée des quantités d'ARNm par rapport aux témoins non traités indiquerait que le composé peut élever l'expression du gène au niveau transcriptionnel. En outre, pour vérifier que cette augmentation de l'ARNm se traduit par la production de protéines, une analyse par Western blot est réalisée. Cette technique permet de visualiser et de quantifier la protéine spécifique codée par le gène 2500003M10Rik. La présence de niveaux de protéines plus élevés dans les cellules contenant le composé validerait la fonction du composé en tant qu'activateur. En intégrant les données de la qPCR et du Western blot, les chercheurs peuvent confirmer que le composé ne se contente pas d'augmenter les niveaux d'ARNm, mais qu'il garantit également l'augmentation de la synthèse de la protéine correspondante. Ces méthodes analytiques rigoureuses sont essentielles pour une évaluation complète de l'effet du composé sur la voie d'expression des gènes, de la transcription à la synthèse des protéines, établissant ainsi un profil clair des propriétés activatrices du composé sur le gène 2500003M10Rik.
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| Nom du produit | CAS # | Ref. Catalogue | Quantité | Prix HT | CITATIONS | Classement |
|---|---|---|---|---|---|---|
(−)-Epigallocatechin Gallate | 989-51-5 | sc-200802 sc-200802A sc-200802B sc-200802C sc-200802D sc-200802E | 10 mg 50 mg 100 mg 500 mg 1 g 10 g | $42.00 $72.00 $124.00 $238.00 $520.00 $1234.00 | 11 | |
L'EGCG agit comme un inhibiteur de kinase, réduisant potentiellement la phosphorylation compétitive et pourrait donc renforcer sélectivement l'activité des kinases qui phosphorylent 2500003M10Rik, entraînant une augmentation de son activité. | ||||||
LY 294002 | 154447-36-6 | sc-201426 sc-201426A | 5 mg 25 mg | $121.00 $392.00 | 148 | |
Le LY294002 est un inhibiteur de PI3K. En inhibant PI3K, il pourrait modifier les voies de signalisation en aval comme AKT, ce qui pourrait conduire à un mécanisme compensatoire qui renforce l'activité de 2500003M10Rik. | ||||||
Wortmannin | 19545-26-7 | sc-3505 sc-3505A sc-3505B | 1 mg 5 mg 20 mg | $66.00 $219.00 $417.00 | 97 | |
La wortmannine, un autre inhibiteur de PI3K, pourrait affecter de la même manière la voie PI3K/AKT, entraînant des changements qui renforcent l'activité de 2500003M10Rik par le biais d'une modulation indirecte des réseaux de signalisation. | ||||||
SB 203580 | 152121-47-6 | sc-3533 sc-3533A | 1 mg 5 mg | $88.00 $342.00 | 284 | |
Le SB203580 est un inhibiteur de la MAPK p38. En inhibant p38, il pourrait modifier l'équilibre de la signalisation cellulaire de manière à renforcer les voies dans lesquelles 2500003M10Rik est impliqué, ce qui entraînerait une augmentation de l'activité de la protéine. | ||||||
A23187 | 52665-69-7 | sc-3591 sc-3591B sc-3591A sc-3591C | 1 mg 5 mg 10 mg 25 mg | $54.00 $128.00 $199.00 $311.00 | 23 | |
A23187 agit comme un ionophore pour le calcium. Un calcium intracellulaire élevé peut activer des voies de signalisation dépendantes du calcium, ce qui pourrait, à son tour, renforcer l'activité de 2500003M10Rik. | ||||||
Staurosporine | 62996-74-1 | sc-3510 sc-3510A sc-3510B | 100 µg 1 mg 5 mg | $82.00 $150.00 $388.00 | 113 | |
En tant qu'inhibiteur de kinases à large spectre, la staurosporine pourrait inhiber les kinases qui régulent négativement 2500003M10Rik, augmentant ainsi indirectement son activité. | ||||||
D-erythro-Sphingosine-1-phosphate | 26993-30-6 | sc-201383 sc-201383D sc-201383A sc-201383B sc-201383C | 1 mg 2 mg 5 mg 10 mg 25 mg | $162.00 $316.00 $559.00 $889.00 $1693.00 | 7 | |
La sphingosine-1-phosphate fonctionne par l'intermédiaire de récepteurs couplés aux protéines G, influençant potentiellement les voies de signalisation qui renforcent l'activité de 2500003M10Rik. | ||||||
Thapsigargin | 67526-95-8 | sc-24017 sc-24017A | 1 mg 5 mg | $94.00 $349.00 | 114 | |
La thapsigargin perturbe l'homéostasie calcique en inhibant la pompe SERCA, ce qui pourrait élever le calcium cytosolique et activer des voies de signalisation qui renforcent l'activité de 2500003M10Rik. | ||||||
Genistein | 446-72-0 | sc-3515 sc-3515A sc-3515B sc-3515C sc-3515D sc-3515E sc-3515F | 100 mg 500 mg 1 g 5 g 10 g 25 g 100 g | $26.00 $92.00 $120.00 $310.00 $500.00 $908.00 $1821.00 | 46 | |
La génistéine est un inhibiteur de tyrosine kinase, qui pourrait atténuer les effets régulateurs négatifs des tyrosine kinases sur le 2500003M10Rik, renforçant ainsi son activité. | ||||||