ZNF831 Lentiviral Activation Particles (h2): sc-414334-LAC-2

Das humane ZNF831-Gen kodiert ein KRAB-haltiges C2H2-Zinkfingerprotein, dem eine Funktion als DNA-bindender Transkriptionsregulator zugeschrieben wird: Es koordiniert Genexpressionsprogramme über sequenzspezifische Promotor-/Enhancer-Interaktionen sowie die Rekrutierung chromatinmodifizierender Corepressor-Komplexe. Über diese Aktivitäten wird ZNF831 mit der epigenetischen Kontrolle von Zellzustandsentscheidungen, immunbezogenen Transkriptionsnetzwerken und breiteren Prozessen wie Differenzierung und inflammatorischer Signalgebung in Verbindung gebracht. Genetische und Expressionsstudien haben ZNF831 mit der Anfälligkeit für immunvermittelte Erkrankungen und einer gestörten Immunhomöostase verknüpft, was seine Relevanz für mechanistische Untersuchungen autoimmunitätsassoziierter regulatorischer Schaltkreise unterstreicht. Eine gezielte Perturbation von ZNF831 ermöglicht es Forschenden, Transkriptionsfaktor-Chromatin-Interaktionen zu analysieren, nachgeschaltete Gennetzwerke zu kartieren und regulatorische Varianten in humanen Zellmodellen zu validieren.

ZNF831 Lentivirale Aktivierungspartikel (h2) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente ZNF831-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

ZNF831 Lentivirale Aktivierungspartikel (h2) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der ZNF831-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen ZNF831-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen ZNF831-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.