Plásmido Doble Nickase (m) ZNF526: sc-431684-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)ZNF526 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ZNF526 (m) y el plásmido de doble nickasa ZNF526 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Zfp526. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) ZNF526 | sc-431684-NIC | 20 µg | $410.00 |
Zfp526 codifica la proteína de ratón con dedos de zinc ZNF526, un supuesto factor nuclear de unión al ADN implicado en la regulación de la transcripción mediante interacciones específicas de secuencia con la cromatina. Como proteína multifinger del tipo C2H2, se espera que ZNF526 participe en redes de regulación génica que influyen en el mantenimiento del estado celular, la especificación de linajes y programas transcripcionales dependientes del contexto. La modulación del control transcripcional mediado por dedos de zinc se entrecruza con vías que gobiernan la regulación epigenética y la señalización del desarrollo, lo que convierte a Zfp526 en un objetivo útil para estudiar la robustez de la expresión génica y la arquitectura regulatoria. La desregulación de factores de transcripción con dedos de zinc se asocia con frecuencia a fenotipos alterados de diferenciación y proliferación en modelos relevantes para enfermedad, lo que respalda la investigación mecanística de Zfp526 en la homeostasis celular.
ZNF526 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Zfp526 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Zfp526. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Zfp526. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Zfp526 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.