Plásmido Doble Nickase (h) ZNF434: sc-412383-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ZNF434 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ZNF434 (h) y el plásmido de doble nickasa ZNF434 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ZSCAN32. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ZNF434 | sc-412383-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ZNF434 | sc-412383-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ZSCAN32 codifica una proteína de dedos de zinc (ZNF434) que, según las predicciones, funciona como un regulador transcripcional que se une al ADN de manera específica de secuencia, en consonancia con el papel de la familia de dedos de zinc tipo C2H2 en la modulación del estado de la cromatina y de los programas de expresión génica. Al influir en redes de transcripción, ZNF434 es relevante para procesos celulares como la diferenciación, el control de la proliferación y la señalización en respuesta al estrés, donde se requiere una regulación estricta de promotores y potenciadores diana. La actividad desregulada de factores de transcripción y la alteración de la regulación de la cromatina son características comunes de la tumorigenesis y de disfunciones relacionadas con el sistema inmunitario, lo que convierte a ZSCAN32/ZNF434 en un locus útil para estudios mecanísticos en modelos relevantes para la enfermedad. Investigar ZNF434 puede ayudar a definir circuitos génicos aguas abajo y perturbaciones de vías asociadas con una regulación transcripcional aberrante.
ZNF434 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ZSCAN32 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ZSCAN32. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ZSCAN32. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ZSCAN32 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.