Plásmido Doble Nickase (h) ZNF263: sc-411418-NIC

ZNF263 codifica un factor de transcripción de dedos de zinc C2H2 que contiene un dominio KRAB y se une a motivos específicos de ADN para regular programas de expresión génica vinculados a la organización de la cromatina y la represión transcripcional. Mediante interacciones con la maquinaria correpresora asociada a KRAB y con modificadores epigenéticos, ZNF263 contribuye al control de la actividad de promotores y potenciadores, influyendo en la progresión del ciclo celular, la diferenciación y la estabilidad del genoma. La alteración de la actividad de ZNF263 o su expresión desregulada se ha asociado con la reconfiguración transcripcional observada en múltiples contextos de enfermedad, incluidas vías relacionadas con el cáncer y una regulación anómala del desarrollo. Como regulador específico de secuencia, ZNF263 se investiga con frecuencia para cartografiar redes reguladoras, identificar dianas genómicas directas y estudiar mecanismos de control epigenético.

ZNF263 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ZNF263 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ZNF263. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ZNF263. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ZNF263 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.