Plasmide Double Nickase (h) ZNF217: sc-408784-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ZNF217 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ZNF217 Double Nickase (h) et le plasmide ZNF217 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ZNF217. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ZNF217 | sc-408784-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ZNF217 | sc-408784-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ZNF217 code un facteur de transcription nucléaire à doigts de zinc de type C2H2, qui agit comme régulateur de l’expression génique associé à la chromatine via des interactions avec des complexes corépresseurs et de modification épigénétique. Il influence des programmes transcriptionnels liés à la progression du cycle cellulaire, à la différenciation et aux réponses aux dommages de l’ADN, et a été associé à des réseaux de signalisation altérés tels que PI3K/AKT et TGF-β/SMAD par la régulation de gènes en aval. Une activité dérégulée de ZNF217 est fréquemment étudiée dans le contexte du reprogrammation transcriptionnelle oncogénique, de l’aneuploïdie et de phénotypes associés aux métastases. ZNF217 constitue ainsi un nœud utile pour disséquer le contrôle de l’état de la chromatine sur l’expression des gènes et le dialogue entre voies de signalisation dans les cellules humaines.
ZNF217 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ZNF217 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ZNF217. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ZNF217. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ZNF217.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.