Plasmide CRISPR/Cas9 KO ZNF131 (h): sc-406166

Présentation

ZNF131 code un facteur de transcription à doigts de zinc contenant un domaine KRAB, impliqué dans la liaison à l’ADN de manière séquence-spécifique et dans la répression génique associée à la chromatine via le recrutement de complexes corépresseurs. En modulant des programmes transcriptionnels liés au contrôle du cycle cellulaire, à la différenciation et aux réponses au stress, ZNF131 peut influencer des voies qui façonnent l’organisation nucléaire et la stabilité épigénétique. Une régulation altérée des réseaux KRAB-ZNF a été associée à des états transcriptionnels dérégulés observés dans divers contextes pathologiques, notamment le cancer et certains phénotypes neurodéveloppementaux. En tant que protéine régulatrice nucléaire, ZNF131 est fréquemment étudiée pour son rôle dans le contrôle transcriptionnel, la dynamique de la chromatine et ses effets dépendants du contexte sur l’identité cellulaire.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO ZNF131 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène ZNF131 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du ZNF131, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert ZNF131 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine ZNF131.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en ZNF131 pour l'étude de la signalisation de ZNF131, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de ZNF131 essentiels à la fonction de ZNF131
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de ZNF131 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le ZNF131 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le ZNF131 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus ZNF131. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le ZNF131 plasmide HDR (h) et le ZNF131 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie ZNF131 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles ZNF131 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.