ZNF101 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-413991

Descripción general

ZNF101 codifica una proteína con dedos de zinc tipo C2H2, predicha como un regulador de la transcripción con unión al ADN específica de secuencia. Como parte de las redes de factores de transcripción con dedos de zinc, se espera que ZNF101 contribuya al control de la expresión génica asociado a la cromatina, influyendo en programas que determinan la identidad celular, la proliferación y las respuestas al estrés. La alteración de la regulación transcripcional mediada por dedos de zinc se asocia con frecuencia a estados epigenéticos desregulados y a fenotipos oncogénicos o del desarrollo, lo que hace que ZNF101 sea relevante para estudios mecanísticos de los circuitos reguladores de genes. Por ello, el ZNF101 humano resulta de interés para cartografiar vías de control transcripcional e identificar funciones dependientes del contexto en la homeostasis celular y en firmas de expresión génica asociadas a enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ZNF101 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ZNF101 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ZNF101 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ZNF101 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ZNF101.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ZNF101 para la investigación de la señalización de ZNF101, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de ZNF101 críticos para la función de ZNF101
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ZNF101 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ZNF101 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ZNF101 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ZNF101. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ZNF101 (h) y el plásmido HDR ZNF101 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ZNF101 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ZNF101 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.