Plásmido Doble Nickase (m) ZIP4: sc-428200-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)ZIP4 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ZIP4 (m) y el plásmido de doble nickasa ZIP4 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Slc39a4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) ZIP4 | sc-428200-NIC | 20 µg | $410.00 |
Slc39a4 de ratón codifica ZIP4, un importador de zinc de membrana plasmática que regula la captación celular de zinc y, con ello, sostiene la actividad de enzimas dependientes de zinc, la función de factores de transcripción y la homeostasis redox. ZIP4 contribuye a la absorción de nutrientes en epitelios y a programas de diferenciación, conectando la disponibilidad de zinc con la señalización proliferativa y las vías de respuesta al estrés. La actividad desregulada de ZIP4 altera la homeostasis del zinc y puede modificar la función de barrera y la señalización inflamatoria, lo que convierte a Slc39a4 en un nodo útil para estudiar el transporte de iones metálicos en la biología metabólica y epitelial. Dado que el zinc es un cofactor crítico para muchas proteínas de unión al ADN y enzimas de reparación, el flujo de zinc dependiente de ZIP4 también puede influir en procesos de mantenimiento del genoma relevantes para fenotipos de enfermedad en sistemas modelo.
ZIP4 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Slc39a4 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Slc39a4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Slc39a4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Slc39a4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.