Plasmide Double Nickase (h) ZIP14: sc-411756-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ZIP14 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ZIP14 Double Nickase (h) et le plasmide ZIP14 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SLC39A14. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ZIP14 | sc-411756-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ZIP14 | sc-411756-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC39A14 code le transporteur d’ions métalliques ZIP14, membre de la famille ZIP localisé à la membrane plasmique et dans les endosomes, qui assure l’entrée cellulaire de cations divalents, avec un rôle majeur dans l’homéostasie du zinc et du manganèse. L’activité de ZIP14 influence la fonction des métalloprotéines, les réponses au stress oxydatif et la signalisation métabolique, et elle recoupe des voies inflammatoires dans les hépatocytes et les cellules immunitaires, où des signaux cytokiniques peuvent moduler l’expression du transporteur. Une altération de la gestion des métaux dépendante de ZIP14 a été associée à une clairance systémique du manganèse modifiée et à des phénotypes de neurotoxicité, et a également été étudiée dans le contexte du métabolisme hépatique et du stress inflammatoire. Par conséquent, SLC39A14 est fréquemment utilisé pour étudier la régulation, dépendante des métaux, de l’activité enzymatique, des réseaux de transporteurs et des programmes d’adaptation au stress dans des modèles cellulaires humains.
ZIP14 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SLC39A14 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SLC39A14. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SLC39A14. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SLC39A14.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.