Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
ZHX2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-436490
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- ZHX2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico ZHX2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ZHX2 Anticuerpo (D-2): sc-393399
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
ZHX2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-436490 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Zhx2 codifica la proteína 2 con dedos de zinc y homeoboxes (ZHX2), un factor de transcripción nuclear que puede actuar como regulador de la expresión génica dependiente del contexto mediante la unión al ADN y las interacciones con otros represores transcripcionales. En tejidos de ratón, ZHX2 se ha implicado en programas de diferenciación y maduración de los hepatocitos y en el control de redes de genes metabólicos enriquecidos en hígado, incluidas vías relacionadas con el manejo de lípidos y el procesamiento de xenobióticos. La actividad alterada de ZHX2 se ha asociado con programas transcripcionales desregulados relevantes para la inflamación y la biología tumoral, lo que lo convierte en un nodo útil para estudiar el control transcripcional de la homeostasis tisular. Estas propiedades respaldan la investigación de los mecanismos cromatínicos y transcripcionales dependientes de ZHX2 en estados celulares relevantes para el desarrollo y la enfermedad.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO ZHX2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Zhx2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Zhx2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Zhx2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ZHX2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Zhx2 para la investigación de la señalización de ZHX2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Zhx2 críticos para la función de ZHX2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Zhx2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido ZHX2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ZHX2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Zhx2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ZHX2 (m) y el plásmido HDR ZHX2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Zhx2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Zhx2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.