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Partículas Lentivirales de Activación (h) ZHX1 | sc-407666-LAC | 200 µl | $455.00 |
La proteína 1 con dedos de zinc y homeoboxes (ZHX1) es un factor de transcripción nuclear que contiene motivos homeobox y de dedo de zinc y participa en programas de expresión génica que controlan decisiones de destino celular, diferenciación y proliferación. ZHX1 suele funcionar como represor transcripcional mediante interacciones con otros factores nucleares y la modulación de complejos reguladores asociados a la cromatina, influyendo en vías vinculadas al desarrollo y la especificación de linaje. Se han descrito alteraciones en la expresión de ZHX1 en múltiples contextos tumorales y en estudios de biología inmunitaria y neuronal, lo que respalda su relevancia en redes transcripcionales asociadas al cáncer y en la homeostasis tisular. Estas características hacen de ZHX1 un objetivo útil para analizar mecanismos endógenos de control transcripcional y la remodelación de vías downstream en modelos celulares humanos.
Las partículas de activación lentiviral ZHX1 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de ZHX1 en una gama más amplia de tipos de células humanas.
Las partículas de activación lentiviral ZHX1 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción ZHX1, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de ZHX1. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo ZHX1 y la arquitectura reguladora.
El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.