Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
ZFP37 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-416996
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- ZFP37 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico ZFP37, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ZFP37 Anticuerpo (15): sc-293086
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
ZFP37 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-416996 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
ZFP37 (proteína de dedos de zinc 37) es un factor de transcripción humano con dedos de zinc C2H2 y dominio KRAB, implicado en la unión al ADN de manera específica de secuencia y en la represión transcripcional. Como parte de complejos reguladores de la cromatina asociados a KRAB–KAP1/TRIM28, se espera que ZFP37 influya en la formación de heterocromatina, el silenciamiento epigenético y el mantenimiento de programas transcripcionales específicos de tipo celular. Estas actividades vinculan a ZFP37 con procesos nucleares fundamentales como la organización de la cromatina, la estabilidad del genoma y el control de la expresión de elementos repetitivos. La regulación alterada de las vías de dedos de zinc KRAB se ha asociado con una diferenciación desregulada y estados transcripcionales oncogénicos, lo que motiva investigar ZFP37 en redes de regulación génica relevantes para enfermedades.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO ZFP37 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ZFP37 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ZFP37 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ZFP37 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ZFP37.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ZFP37 para la investigación de la señalización de ZFP37, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de ZFP37 críticos para la función de ZFP37
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ZFP37 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido ZFP37 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ZFP37 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ZFP37. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ZFP37 (h) y el plásmido HDR ZFP37 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ZFP37 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ZFP37 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.