Plásmido Doble Nickase (h) ZFP106: sc-405869-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ZFP106 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ZFP106 (h) y el plásmido de doble nickasa ZFP106 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ZNF106. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ZFP106 | sc-405869-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ZFP106 | sc-405869-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ZNF106 codifica ZFP106, una proteína con dedos de zinc implicada en el metabolismo nuclear del ARN y en la regulación de programas de expresión génica que sustentan la homeostasis de las neuronas y las células musculares. ZFP106 se ha asociado con el procesamiento del ARN y la estabilidad de los transcritos, lo que la vincula a vías que coordinan la diferenciación, las respuestas al estrés y el mantenimiento de tipos celulares de larga vida. Estudios genéticos relacionan la disfunción de ZNF106 con fenotipos neuromusculares y neurodegenerativos, en consonancia con funciones en la integridad de las motoneuronas y el mantenimiento muscular. Estas características hacen de ZNF106 una diana útil para investigar cómo los factores implicados en el manejo del ARN determinan la vulnerabilidad celular y los cambios transcripcionales asociados a la degeneración.
ZFP106 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ZNF106 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ZNF106. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ZNF106. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ZNF106 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.