ZFHX4 Lentiviral Activation Particles (m): sc-429838-LAC

Zfhx4 kodiert ZFHX4, einen großen Homeobox-Transkriptionsfaktor mit mehreren Zinkfingerdomänen, der Genexpressionsprogramme reguliert, die mit neuronaler Differenzierung, Axonführung und der Aufrechterhaltung der Zellidentität verknüpft sind. Durch DNA-Bindung und die Koordination transkriptioneller Netzwerke kann ZFHX4 chromatinassoziierte Regulationsprozesse und entwicklungsbiologische Signalwege beeinflussen, die die Festlegung von Zelllinien steuern. Eine veränderte ZFHX4-Expression wurde in Studien zu neuroentwicklungsbezogenen Phänotypen sowie in molekularen Profilierungen verschiedener Tumorkontexte beschrieben, was ZFHX4 zu einem nützlichen Ziel für die Untersuchung transkriptioneller Kontrolle in krankheitsrelevanten Modellen macht. In Mausmodellen wird Zfhx4 häufig hinsichtlich seiner Beiträge zur neuronalen Entwicklung untersucht sowie danach, wie transkriptionsfaktorgesteuerte Programme mit Proliferations- und Differenzierungszuständen zusammenwirken.

ZFHX4 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Zfhx4-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

ZFHX4 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Zfhx4-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen ZFHX4-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Zfhx4-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.