Plasmide Double Nickase (m) ZDHHC9: sc-431594-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) ZDHHC9 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ZDHHC9 Double Nickase (m) et le plasmide ZDHHC9 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Zdhhc9. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) ZDHHC9 | sc-431594-NIC | 20 µg | $410.00 |
Zdhhc9 code pour ZDHHC9, une palmitoyltransférase de la famille DHHC qui catalyse la S‑palmitoylation de substrats protéiques afin de réguler leur association aux membranes, leur trafic et la compartimentation des signaux. En modulant la localisation, dépendante de la lipidation, de protéines de signalisation, ZDHHC9 contribue à des voies qui contrôlent la dynamique vésiculaire et la communication cellulaire, avec des effets en aval sur les programmes de croissance et de différenciation. Dans les systèmes murins, une palmitoylation médiée par les DHHC altérée a été associée à des phénotypes neurodéveloppementaux et à des réseaux de signalisation dérégulés, ce qui fait de Zdhhc9 un point d’entrée utile pour étudier comment une lipidation post‑traductionnelle façonne la fonction cellulaire. Son activité est souvent analysée en parallèle avec d’autres composants de la machinerie de palmitoylation et avec l’organisation des microdomaines membranaires afin de relier la modification des substrats aux effets fonctionnels sur les voies.
ZDHHC9 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Zdhhc9 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Zdhhc9. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Zdhhc9. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Zdhhc9.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.