Plasmide Double Nickase (m) ZC3H4: sc-436020-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) ZC3H4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ZC3H4 Double Nickase (m) et le plasmide ZC3H4 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Zc3h4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) ZC3H4 | sc-436020-NIC | 20 µg | $410.00 |
Zc3h4 code la protéine à doigts de zinc de type CCCH ZC3H4, un facteur associé à l’ARN impliqué dans la régulation nucléaire des gènes et les processus du métabolisme de l’ARN. ZC3H4 a été associée au contrôle de la production transcriptionnelle via des interactions avec la machinerie de maturation de l’ARN, contribuant à la bonne maturation et au renouvellement des ARNm, et influençant ainsi les programmes d’expression génique. En modulant le devenir des ARN et les processus liés à la transcription, ZC3H4 peut affecter les transitions d’état cellulaire, les réponses au stress et les réseaux de signalisation prolifératifs. La dérégulation de la maturation de l’ARN et du contrôle transcriptionnel étant largement impliquée dans la biologie des maladies, Zc3h4 constitue un locus utile pour des études mécanistiques du contrôle de l’expression génique dans des modèles murins.
ZC3H4 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Zc3h4 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Zc3h4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Zc3h4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Zc3h4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.