Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
ZAG Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419279
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- ZAG El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico ZAG, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ZAG Anticuerpo (F-6): sc-271957
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
ZAG Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419279 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Azgp1 codifica la zinc-α2-glicoproteína (ZAG), una glicoproteína secretada de tipo adipocina que se expresa en múltiples tejidos y contribuye a la movilización sistémica de lípidos y al equilibrio energético. En las redes metabólicas del ratón, ZAG se ha vinculado con la regulación de la lipólisis de los adipocitos, la modulación del uso de ácidos grasos y la interacción con la señalización inflamatoria en los microambientes del tejido adiposo y el hígado. La expresión alterada de Azgp1/ZAG se estudia con frecuencia en el contexto de la disfunción metabólica asociada a la obesidad y de cambios en la sensibilidad a la insulina, así como en fenotipos más amplios relacionados con la caquexia y la inflamación. Como factor circulante y asociado a la matriz extracelular, ZAG también es relevante para investigaciones sobre remodelación tisular y comunicación intercelular.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO ZAG (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Azgp1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Azgp1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Azgp1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ZAG.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Azgp1 para la investigación de la señalización de ZAG, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Azgp1 críticos para la función de ZAG
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Azgp1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido ZAG CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ZAG CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Azgp1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ZAG (m) y el plásmido HDR ZAG (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Azgp1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Azgp1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.