Plásmido Doble Nickase (h2) YTHDF2: sc-416408-NIC-2
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h2)YTHDF2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa YTHDF2 (h2) y el plásmido de doble nickasa YTHDF2 (h22) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a YTHDF2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h2) YTHDF2 | sc-416408-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen humano YTHDF2 codifica una proteína lectora de m6A que se une de manera selectiva a ARNm modificados con N6‑metiladenosina y promueve su degradación, modulando así la estabilidad de los transcritos y el resultado de la traducción. Mediante el reclutamiento de la maquinaria de desadenilación y de recambio de ARN, YTHDF2 contribuye a la regulación posranscripcional en procesos que incluyen decisiones de destino celular, respuestas al estrés y señalización inmunitaria. La actividad desregulada de YTHDF2 se ha relacionado con un control epitranscriptómico alterado en la biología del cáncer, la inflamación y modelos de infección viral, donde cambios en la eliminación de ARNm pueden reconfigurar programas de expresión génica. La edición del genoma de YTHDF2 respalda estudios mecanísticos del metabolismo de ARN dependiente de m6A, el mapeo de redes lector–diana y el análisis funcional de vías que gobiernan la proliferación, la diferenciación y la regulación de la inmunidad innata.
YTHDF2 El plásmido de doble nicasa (h2) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus YTHDF2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de YTHDF2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de YTHDF2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con YTHDF2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.