Plasmide Double Nickase (h) WSB1: sc-411879-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) WSB1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide WSB1 Double Nickase (h) et le plasmide WSB1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant WSB1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: WSB1 Antibody (A-10): sc-393483
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) WSB1 | sc-411879-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) WSB1 | sc-411879-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
WSB1 (WD repeat and SOCS box containing 1) code une composante de reconnaissance du substrat des complexes d’ubiquitine‑ligase E3 de type Cullin‑RING, assurant la liaison de cibles protéiques spécifiques à l’ubiquitination et à leur dégradation par le protéasome. Grâce à son domaine à répétitions WD et à sa boîte SOCS, WSB1 contribue à coordonner le contrôle qualité des protéines et le remodelage, dépendant des signaux, des protéomes cellulaires, avec des effets en aval sur les réponses au stress, la signalisation des facteurs de croissance et les programmes transcriptionnels. Une activité altérée de WSB1 a été étudiée dans des contextes où la régulation médiée par l’ubiquitine contribue à des phénotypes associés aux maladies, notamment en biologie tumorale et dans l’adaptation cellulaire dérégulée à l’hypoxie et au stress. En tant que nœud des circuits de la voie de l’ubiquitine, WSB1 est fréquemment étudiée pour son impact sur la dynamique des voies de signalisation et sur la régulation dépendante de la protéostasie.
WSB1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus WSB1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de WSB1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de WSB1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de WSB1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.