Wnt-7b Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423722

Descripción general

Wnt7b codifica la glicoproteína secretada Wnt-7b, un ligando que activa la señalización Wnt canónica y no canónica para regular decisiones de destino celular, proliferación, polaridad y el patrón tisular durante la embriogénesis y la homeostasis posnatal en el ratón. La unión de Wnt-7b a los receptores Frizzled/LRP influye tanto en la transcripción dependiente de β-catenina como en la polaridad celular planar y en vías vinculadas a Ca²⁺, moldeando las interacciones epitelio-mesénquima y la morfogénesis de órganos. La actividad desregulada de Wnt7b se ha asociado con programas de desarrollo aberrantes y procesos de remodelación que convergen con la señalización oncogénica, la fibrosis y microambientes inflamatorios en múltiples contextos tisulares. Como nodo de la vía, Wnt-7b se estudia con frecuencia por sus funciones en el comportamiento de células madre/progenitoras, la biología vascular y de las vías aéreas, y la interacción con la señalización de TGF-β, Hedgehog y Notch.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Wnt-7b (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Wnt7b en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Wnt7b junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Wnt7b tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Wnt-7b.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Wnt7b para la investigación de la señalización de Wnt-7b, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Wnt7b críticos para la función de Wnt-7b
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Wnt7b para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Wnt-7b CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Wnt-7b CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Wnt7b. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Wnt-7b (m) y el plásmido HDR Wnt-7b (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Wnt7b para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Wnt7b definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.