Wnt-7a CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423721

개요

Wnt7a는 분비성 리간드인 Wnt-7a를 암호화하며, β-카테닌 의존적 전사를 비롯해 세포골격 역학과 평면 세포 극성(planar cell polarity)을 조절하는 비정형(non-canonical) 경로의 출력에도 영향을 미치는 Wnt 신호전달의 핵심 조절자입니다. 생쥐 조직에서 Wnt-7a는 배아 패터닝과 기관형성에 기여하고, Frizzled/LRP 수용체와의 결합을 통해 세포 운명 결정, 증식, 이동을 조율하는 데 도움을 줍니다. Wnt7a 활성의 변화는 Wnt 경로의 강도(tone)와 피드백 루프가 유전자 발현 상태를 형성하는 비정상적 발달 프로그램 및 조직 항상성 조절 이상과 관련된 맥락에서 자주 연구됩니다. 광범위한 하위 신호 효과를 갖는 경로 노드로서 Wnt-7a는 형태형성, 줄기/전구세포의 거동, 조직 구조의 리모델링에서의 역할을 규명하기 위해 흔히 조사됩니다.

Wnt-7a CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Wnt7a 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Wnt7a 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Wnt7a의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Wnt-7a 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Wnt-7a 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Wnt7a 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Wnt-7a 기능에 중요한 Wnt7a 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Wnt7a 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Wnt-7a CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Wnt-7a CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Wnt7a 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Wnt-7a HDR 플라스미드 (m) 및 Wnt-7a HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Wnt7a 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Wnt7a 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.