Wnt-5b CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423719

개요

마우스 Wnt5b는 분비성 당단백질인 Wnt-5b를 암호화하며, Wnt-5b는 비정형(non-canonical) Wnt 리간드로서 발생과 조직 항상성 과정에서 세포 극성, 방향성 이동, 세포골격 재구성을 조절합니다. Wnt-5b는 평면세포극성(PCP) 경로 및 Wnt/Ca2+ 신호전달과 같은 β-카테닌 비의존성 경로를 통해 우선적으로 신호를 전달하며, Frizzled를 비롯한 수용체와 ROR 계열 티로신 키나아제 같은 공동수용체를 통해 하위의 JNK, PKC 및 소형 GTPase 활성을 정밀하게 조절합니다. 이러한 경로는 형태형성, 신경계 패터닝, 기질–상피 간 상호작용에 영향을 미치며, WNT5B 발현의 이상 조절은 질환 관련 맥락에서 분화 프로그램의 변화 및 침습적 세포 행동과 연관되어 왔습니다. 염증 및 세포외기질 신호와 교차하는 경로의 핵심 노드로서 Wnt-5b는 발생, 대사, 종양 미세환경 생물학 모델에서 자주 연구됩니다.

Wnt-5b CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Wnt5b 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Wnt5b 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Wnt5b의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Wnt-5b 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Wnt-5b 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Wnt5b 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Wnt-5b 기능에 중요한 Wnt5b 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Wnt5b 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Wnt-5b CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Wnt-5b CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Wnt5b 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Wnt-5b HDR 플라스미드 (m) 및 Wnt-5b HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Wnt5b 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Wnt5b 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.