Wnt-15 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406368

개요

WNT9B는 발달 과정에서 세포 운명 결정, 증식, 극성, 조직 패터닝을 조절하는 Wnt 신호를 활성화하는 리간드인 분비성 당단백질 Wnt-15를 암호화합니다. Wnt-15는 Frizzled 수용체 및 공동수용체와의 상호작용을 통해 β-카테닌 의존적 전사 프로그램뿐 아니라 세포골격 역학과 방향성 이동을 조절하는 비정형(논-캐노니컬) 경로에도 영향을 줄 수 있습니다. WNT9B의 활성은 기관형성을 형성하는 형태형성인자(morphogen) 농도 구배와 관련되어 있으며, Wnt 신호의 이상 조절은 선천성 기형과 종양 형성 과정 전반과 광범위하게 연관되어 있습니다. 인간 세포 모델에서 WNT9B는 성장인자 신호 및 분화를 관장하는 전사 네트워크와의 경로 간 상호작용(cross-talk)을 규명하기 위한 연구 접근점으로 활용하기에 용이합니다.

Wnt-15 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 WNT9B 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 WNT9B 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 WNT9B의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Wnt-15 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Wnt-15 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 WNT9B 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Wnt-15 기능에 중요한 WNT9B 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 WNT9B 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Wnt-15 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Wnt-15 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 WNT9B 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Wnt-15 HDR 플라스미드 (h) 및 Wnt-15 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 WNT9B 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 WNT9B 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.