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WISP-1双切口酶质粒(h) | sc-402559-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
WISP-1双切口酶质粒(h2) | sc-402559-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
WISP1 编码 WISP-1(WNT1 诱导的信号通路蛋白 1),它是 CCN 家族中的一种分泌型基质细胞蛋白(matricellular protein),可调控细胞–基质相互作用以及生长因子信号传导。WISP-1 在 Wnt/β-连环蛋白信号的下游被诱导表达,并与整合素(integrin)及 TGF-β 相关通路发生交互,从而影响细胞黏附、迁移、增殖以及细胞外基质重塑。在人体组织中,WISP1 表达异常与纤维化重塑及肿瘤相关基质程序有关,并会影响上皮–间质转化(EMT)和组织修复反应。这些功能使 WISP1 成为研究 Wnt 驱动的信号网络及微环境依赖性表型的有用靶点。
WISP-1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 WISP1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对WISP1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏WISP1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了WISP1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。