Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide Double Nickase (h) Wee 1: sc-400701-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Wee 1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Wee 1 Double Nickase (h) et le plasmide Wee 1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant WEE1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Wee 1 Antibody (B-11): sc-5285
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Wee 1 | sc-400701-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Wee 1 | sc-400701-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **WEE1** code la kinase Wee1, un régulateur central du point de contrôle G2/M qui limite l’activité de CDK1–cycline B par phosphorylation inhibitrice, coordonnant ainsi l’achèvement de la réplication de l’ADN avec l’entrée en mitose. Wee1 intègre des signaux issus des voies de réponse aux dommages de l’ADN et au stress réplicatif, et coopère avec la signalisation ATR/CHK1 pour stabiliser les fourches de réplication bloquées et préserver l’intégrité du génome. Une fonction ou une expression altérée de **WEE1** est associée à une progression déréglée du cycle cellulaire, à une tolérance accrue au stress de réplication et à l’instabilité chromosomique, des processus fréquemment étudiés en biologie du cancer. En tant que kinase de point de contrôle, Wee1 est également pertinente pour l’étude de l’apoptose, de la catastrophe mitotique et des dépendances aux voies de réparation de l’ADN.
Wee 1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus WEE1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de WEE1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de WEE1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de WEE1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.