Plásmido Doble Nickase (h) WDSOF1: sc-411819-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)WDSOF1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa WDSOF1 (h) y el plásmido de doble nickasa WDSOF1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a DCAF13. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) WDSOF1 | sc-411819-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen humano DCAF13 (también conocido como WDSOF1) codifica un factor asociado a DDB1 y CUL4 que se cree que actúa como receptor de sustrato dentro de los complejos de ligasa E3 de ubiquitina CUL4–DDB1, favoreciendo la ubiquitinación selectiva y la proteostasis. A través del control dependiente de la ubiquitina de la estabilidad proteica, DCAF13 puede influir en la progresión del ciclo celular, la organización nuclear y los programas de señalización sensibles al estrés. La regulación alterada de las vías de ligasas de ubiquitina se vincula con frecuencia a una proliferación desregulada y a la conservación del genoma, lo que convierte a DCAF13 en una diana relevante para estudios mecanísticos del control del crecimiento y la remodelación del proteoma. En contextos de investigación biomédica, la perturbación de DCAF13 se utiliza para explorar cómo la ubiquitinación dependiente de CUL4/DDB1 se integra con la regulación transcripcional y la aptitud celular.
WDSOF1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus DCAF13 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de DCAF13. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de DCAF13. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con DCAF13 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.