VIP CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423677

개요

Vip는 장혈관활성 펩타이드(vasoactive intestinal peptide, VIP)를 암호화하는 유전자로, 주로 GPCR인 VIPR1과 VIPR2를 통해 신호를 전달하여 아데닐릴 사이클레이스를 자극하고 cAMP를 증가시키며 PKA/CREB 의존적 전사 프로그램을 활성화합니다. 마우스에서 VIP는 신경내분비적 의사소통, 시교차상핵 내 일주기 리듬의 조율, 그리고 말초 조직 전반에서 평활근 긴장 조절, 혈관 확장, 분비 활성 조절에 기여합니다. VIP 매개 신호전달은 면역세포의 분극과 사이토카인 생산을 조절하여, 이 경로를 염증 항상성과 점막 장벽 기능과 연결합니다. VIP/VIPR 신호전달의 조절 이상은 변화된 신경염증 반응, 위장관 운동성과 분비 관련 표현형, 그리고 질환 모델에서 종양 연관 면역 및 신경내분비 특성에 대한 맥락 의존적 영향과 연관되어 왔습니다.

VIP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Vip 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Vip 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Vip의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 VIP 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 VIP 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Vip 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• VIP 기능에 중요한 Vip 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Vip 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• VIP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 VIP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Vip 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  VIP HDR 플라스미드 (m) 및 VIP HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Vip 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Vip 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.