VEZF1 Double Nickase Plasmid (m): sc-423670-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das VEZF1 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- VEZF1 Double-Nickase-Plasmid (m) und VEZF1 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Vezf1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
VEZF1 Double Nickase Plasmid (m) | sc-423670-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
VEZF1 Double Nickase Plasmid (m2) | sc-423670-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Vezf1 kodiert VEZF1, einen zinkfingerhaltigen, DNA-bindenden Transkriptionsfaktor, der vor allem in endothelialen und hämatopoetischen Kontexten angereichert ist und dazu beiträgt, die Gefäßentwicklung und die Musterbildung von Blutgefäßen zu koordinieren. VEZF1 reguliert Genexpressionsprogramme, die mit Angiogenese, endothelialer Differenzierung und chromatinassoziierter transkriptioneller Kontrolle verknüpft sind, und steht in Wechselwirkung mit Signalwegen, die die vaskuläre Integrität und die Gewebeperfusion prägen. In Mausmodellen beeinflusst eine veränderte Vezf1-Aktivität die vaskuläre Morphogenese und die embryonale Lebensfähigkeit, was das Gen für die Untersuchung von Mechanismen relevant macht, die entwicklungsbedingten Gefäßdefekten und endothelialer Dysfunktion zugrunde liegen. Seine transkriptionellen Funktionen unterstützen zudem Untersuchungen dazu, wie vaskuläre Genregulationsnetzwerke in experimentellen Krankheitsmodellen zu pathologischer Neovaskularisierung und zu entzündungsassoziiertem vaskulärem Remodeling beitragen.
VEZF1 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Vezf1-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Vezf1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Vezf1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Vezf1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.