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VDUP1双切口酶质粒(h) | sc-400664-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
VDUP1双切口酶质粒(h2) | sc-400664-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TXNIP(又称 VDUP1)编码一种与硫氧还蛋白(thioredoxin)相互作用的蛋白,通过抑制硫氧还蛋白活性来限制细胞的氧化还原缓冲能力,从而将氧化应激与下游信号转导结果联系起来。它可被代谢应激和内质网应激诱导,并整合葡萄糖感知、炎症信号以及转录调控因子的输入,进而调节细胞凋亡、增殖与细胞代谢。TXNIP 参与调控活性氧(ROS)稳态的通路,并可在氧化应激与代谢应激交汇的情况下促进 NLRP3 炎性小体的激活。TXNIP 表达失衡与心代谢疾病、神经炎症以及肿瘤生物学相关,因此是研究应激适应机制与免疫代谢信号的重要节点。
VDUP1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 TXNIP 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对TXNIP内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏TXNIP的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了TXNIP基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。