Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Vav (m): sc-423655
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Vav Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Vav, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Vav Antibody (D-7): sc-8039
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Vav (m) | sc-423655 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Vav1 code Vav, un facteur d’échange de nucléotides guanine spécifique des cellules hématopoïétiques, qui active des GTPases de la famille Rho telles que Rac1 et Cdc42 afin de coordonner le remodelage du cytosquelette et la propagation des signaux. Dans les cellules immunitaires murines, Vav1 intègre la signalisation en aval des récepteurs de l’antigène et des récepteurs Fc, reliant les voies des tyrosine kinases aux programmes transcriptionnels dépendants des MAPK, de NF-κB et du calcium. Ces activités façonnent le développement, l’activation et la migration des lymphocytes T, et influencent les fonctions effectrices induites par l’antigène au sein des différentes lignées lymphoïdes. Une signalisation dérégulée de Vav1 a été associée à des dysfonctionnements immunitaires et à des contextes de signalisation oncogénique dans des modèles de maladies hématologiques, ce qui en fait un nœud clé pour les études mécanistiques des réseaux de signalisation des leucocytes.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Vav (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Vav1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Vav1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Vav1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Vav.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Vav1 pour l'étude de la signalisation de Vav, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Vav1 essentiels à la fonction de Vav
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Vav1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Vav plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Vav plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Vav1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Vav plasmide HDR (m) et le Vav (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Vav1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Vav1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.