Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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VASP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423654
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- VASP O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico VASP, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:VASP Anticorpo (A-11): sc-46668
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
VASP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423654 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Vasp codifica a fosfoproteína estimulada por vasodilatador (VASP), uma proteína reguladora de actina da família Ena/VASP que coordena o alongamento dos filamentos de actina, a dinâmica das adesões focais e a protrusão de membrana durante a migração celular. A VASP integra sinais a jusante de quinases dependentes de cAMP/cGMP e de GTPases da família Rho, acoplando o estado de fosforilação à remodelação do citoesqueleto e à mecanotransdução. Em células de camundongo, a VASP contribui para funções plaquetárias e endoteliais, o crescimento de neuritos e a motilidade de células imunes por meio da regulação da adesão, das propriedades de barreira e do movimento direcionado. A desregulação da dinâmica de actina dependente de VASP tem sido implicada em modelos de disfunção vascular, fenótipos relacionados à trombose e alterações de comportamento invasivo relevantes para a inflamação e a biologia do câncer.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO VASP (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Vasp em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Vasp, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Vasp na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína VASP.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Vasp para a investigação da sinalização de VASP, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Vasp críticos para a função VASP
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Vasp para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo VASP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo VASP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Vasp. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo VASP Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR VASP (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Vasp para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Vasp definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.