Plasmide CRISPR/Cas9 KO Vasohibin-1 (h): sc-403526

Présentation

VASH1 code la vasohibine‑1, un régulateur de l’angiogenèse d’origine endothéliale, induit par des signaux pro‑angiogéniques et agissant comme un contrôle par rétroaction négative de la formation de nouveaux vaisseaux. La vasohibine‑1 a été associée à la modulation de la prolifération et de la migration des cellules endothéliales, au remodelage vasculaire et à la dynamique des microtubules via son activité de carboxypeptidase de la tubuline et ses interactions avec des cofacteurs tels que SVBP. Une expression altérée de VASH1 a été rapportée dans la vascularisation associée aux tumeurs ainsi que dans des situations impliquant une néovascularisation pathologique et une inflammation chronique, ce qui souligne sa pertinence pour l’étude de l’homéostasie vasculaire. Par conséquent, VASH1 est fréquemment étudié dans les voies qui gouvernent les réponses endothéliales au stress, l’ischémie tissulaire et la signalisation extracellulaire qui façonne le microenvironnement angiogénique.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Vasohibin-1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène VASH1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du VASH1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert VASH1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Vasohibin-1.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en VASH1 pour l'étude de la signalisation de Vasohibin-1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de VASH1 essentiels à la fonction de Vasohibin-1
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de VASH1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le Vasohibin-1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Vasohibin-1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus VASH1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le Vasohibin-1 plasmide HDR (h) et le Vasohibin-1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie VASH1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles VASH1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.