Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ValRS Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423653
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- ValRS El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico ValRS, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ValRS Anticuerpo (D-7): sc-166674
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
ValRS Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423653 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Vars codifica la valil‑ARNt sintetasa (ValRS), una aminoacil‑ARNt sintetasa citosólica que une la valina a su ARNt cognado, garantizando la fidelidad de la traducción y la homeostasis del proteoma. Al mantener una decodificación precisa durante la síntesis proteica, ValRS sustenta procesos fundamentales como la función ribosomal, las respuestas integradas al estrés por desequilibrio de aminoácidos y redes más amplias de proteostasis. La alteración de la carga de aminoacil‑ARNt puede perturbar el crecimiento celular y la adaptación al estrés, vinculando esta vía con mecanismos relevantes para el neurodesarrollo, la biología neuromuscular y la coordinación mitocondria–citoplasma a través de cambios en la demanda del proteoma.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO ValRS (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Vars en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Vars junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Vars tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ValRS.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Vars para la investigación de la señalización de ValRS, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Vars críticos para la función de ValRS
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Vars para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido ValRS CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ValRS CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Vars. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ValRS (m) y el plásmido HDR ValRS (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Vars para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Vars definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.