USP51 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-414805

Übersicht

USP51 kodiert eine ubiquitin-spezifische Protease, die an der Deubiquitinierung beteiligt ist – einem zentralen Regulationsschritt, der Proteinstität, subzelluläre Lokalisation und die Signalstärke steuert. Durch das Rückgängigmachen von Ubiquitin-Konjugationen kann USP51 die Proteostase und die Dynamik von Multiproteinkomplexen beeinflussen, mit nachgeschalteten Effekten auf den Zellzyklus, DNA-Schadensantworten und stressadaptives Signaling. Veränderte Aktivität von Deubiquitinasen ist häufig mit einer Fehlregulation des Ubiquitin-Proteasom-Systems verbunden, wie sie in der Krebsbiologie und anderen Erkrankungen mit Genominstabilität oder aberranter Signalgebung beobachtet wird. USP51 ist daher von Interesse, um die Regulation ubiquitinabhängiger Signalwege zu untersuchen und kontextspezifische Abhängigkeiten in humanen Zellmodellen zu identifizieren.

Das USP51 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des USP51-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des USP51-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von USP51 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die USP51-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von USP51-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der USP51-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf USP51-Exone abzielen, die für die USP51-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere USP51-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom USP51 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom USP51 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des USP51-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das USP51 HDR-Plasmid (h) und USP51 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von USP51-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten USP51-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.