Plasmide Double Nickase (h) URB: sc-408597-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) URB correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide URB Double Nickase (h) et le plasmide URB Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CCDC80. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) URB | sc-408597-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) URB | sc-408597-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CCDC80 code pour URB, une protéine sécrétée associée à la matrice extracellulaire, impliquée dans le remodelage du stroma, l’adhérence cellulaire et la régulation de la migration cellulaire. URB a été reliée à des réseaux de signalisation qui influencent l’adipogenèse et l’homéostasie métabolique, notamment via des interactions avec des voies liées au TGF-β et l’organisation de la matrice extracellulaire. Des altérations de l’expression de CCDC80 ont été rapportées dans de nombreux types de tumeurs ainsi que dans des contextes métaboliques et fibrotiques, ce qui étaye son intérêt en tant que nœud moléculaire pour étudier la régulation, par le microenvironnement, de la prolifération, de l’invasion et de la différenciation. Ces propriétés font d’URB une cible pertinente pour disséquer les interactions gène–matrice et les programmes transcriptionnels qui contrôlent le remodelage tissulaire.
URB Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CCDC80 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CCDC80. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CCDC80. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CCDC80.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.